中性粒細胞性支氣管哮喘小鼠模型的建立及其氣道高反應規律的研究

摘要：目的 通過建立中性粒細胞性哮喘(neutrophilic asthma,NA)模型,檢測NA、嗜酸粒細胞性哮喘(eosinophilic asthma,EA)小鼠模型氣道阻力、氣道高反應的變化,探討不同氣道炎癥狀態下哮喘小鼠氣道高反應性(airway hyperreactivity,AHR)的特點.方法 BALB/c小鼠,隨機分成NA組、EA組、正常組(NS組).NA組給予卵蛋白、脂多糖氣道滴入致敏,EA組給予卵蛋白腹腔注射致敏,兩組均于第21天起給予卵蛋白霧化激發.NS組用生理鹽水致敏與激發,方法同NA組.采用Buxco小鼠肺功能儀于霧化第1、7、14天檢測氣道阻力的變化.肺組織HE染色及PAS染色,觀察肺組織病理改變及杯狀細胞增生變化.收集支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),進行細胞總數及分類計數.結果 ①3.125～50 mg/ml乙酰甲膽堿(methacholine,Mch)NA組、EA組激發第1天AHR高于NS組;12.5～50 mg/ml Mch NA組AHR高于EA組(P值均＜0.05).②50 mg/ml Mch NA組、EA組激發第1天AHR高于激發第7、第14天(P＜0.05).③激發第1天NA組、EA組BALF細胞總數及分類計數與NS組無差異(P＞0.05);激發第7、第14天NA組、EA組BALF中細胞總數較NS組、激發第1天升高(P＜0.05).NA組BALF中中性粒細胞(NEU)%高于EA組、NS組和激發第1天,嗜酸粒細胞(EOS)%高于NS組、激發第1天而低于EA組(P值均＜0.05).EA組BALF中EOS%、NEU%均高于NS組和激發第1天(P值均＜0.05).④激發第7、14天NA組、EA組均可見肺泡間隔炎癥細胞浸潤;NA組以NEU浸潤為主,EA組EOS浸潤明顯.⑤激發第1天NA組、EA組杯狀細胞%較NS組無差異(P＞0.05);激發第7、14天NA組、EA組較NS組及激發第1天升高(P＜0.05).⑥NA組、EA組激發第1天AHR與氣道炎癥無相關;而持續激發NA組AHR與細胞總數、NEU %、杯狀細胞 %呈正相關;EA組AHR與細胞總數、EOS%、杯狀細胞%呈正相關.結論 LPS聯合OVA氣道致敏可成功建立NA小鼠模型,NA小鼠較EA小鼠具有更嚴重的氣道高反應,持續變應原激發可降低NA