膠質(zhì)瘤干細(xì)胞趨化神經(jīng)干細(xì)胞遷移及其機(jī)制研究

摘要：目的觀察神經(jīng)干細(xì)胞（NSC）向膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（GSC）及其分化細(xì)胞的遷移能力，探討其趨化機(jī)制。方法干細(xì)胞條件培養(yǎng)U251和3例原代膠質(zhì)瘤干細(xì)胞，以流式細(xì)胞術(shù)和Westernblot對(duì)其鑒定；Transwell小室法檢測(cè)GSC和其分化細(xì)胞條件培養(yǎng)液（CM）對(duì)NSC遷移的趨化能力；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)CM中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）的分泌水平，并以表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、bFGF為對(duì)照分析CM對(duì)NSC的化學(xué)趨化作用；進(jìn)一步以Dio和Dil分別標(biāo)記NSC和GSC，體外混合培養(yǎng)觀察NSC向GSC的遷移、以及對(duì)腫瘤干細(xì)胞球生長(zhǎng)的影響。結(jié)果干細(xì)胞培養(yǎng)條件下的膠質(zhì)瘤干細(xì)胞球，高表達(dá)干細(xì)胞標(biāo)志物Nestin和／或CD133（11．02％-33．55％）；分化后干細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)下降，分化標(biāo)志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）表達(dá)增加（P〈0．05）；GSC與其分化細(xì)胞比較，分泌高水平的趨化因子VEGF和bFGF（P〈0．05），并對(duì)NSC有高度趨化能力；體外混合接觸培養(yǎng)也顯示NSC向腫瘤干細(xì)胞球的遷移和包繞，并且能夠顯著抑制腫瘤干細(xì)胞球的生長(zhǎng)（P〈0．05）。結(jié)論GSC體外可趨化NSC向其遷移，其趨化作用較分化的腫瘤細(xì)胞更為顯著，并且與其分泌高水平的生長(zhǎng)因子有關(guān)；向腫瘤干細(xì)胞球遷移的NSC可抑制其體外生長(zhǎng)。