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    首頁 > 期刊 > 自然科學與工程技術 > 醫藥衛生科技 > 基礎醫學 > 中華實驗和臨床病毒學 > H5N1亞型流感病毒M2與NA基因真核表達載體的構建與鑒定 【正文】

    H5N1亞型流感病毒M2與NA基因真核表達載體的構建與鑒定

    郭建強; 姚立紅; 陳愛珺; 劉曉宇; 付金奇; 徐鵬衛; 張智清 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所; 病毒基因工程國家重點實驗室; 北京100052
    • 流感病毒a型
    • 病毒蛋白質類
    • 神經氨酸酶
    • 表達的序列標記

    摘要:目的 構建表達H5N1亞型流感病毒M2和NA基因的多種真核表達載體.方法 以我國分離的首株人H5N1亞型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)作為研究對象,PCR擴增全長M2與NA基因.將M2基因克隆入真核表達載體pStar的IRES上游或下游的MCS,構建重組pStar-M2/和pStar-/M2.將NA基因克隆人pStar載體IRES上游或下游的MCS,構建重組pStar-NA/和pStar-/NA.將M2和NA基因先后克隆到pStar載體IRES序列的上游和下游MCS,分別構建雙基因共表達重組pStar-M2/NA和pStar-NA/M2.將重組質粒轉染293細胞,使用IFA方法 檢測各重組質粒相應外源基因的表達.結果 通過酶切鑒定,各重組質粒構建正確.將其轉染293細胞后,使用IFA方法 檢測到了各重組質粒中相應外源基因的表達.結論 構建了多種表達H5NI亞型流感病毒M2和(或)NA基因的真核表達載體,為研究開發流感DNA疫苗奠定了基礎.

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