細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)重組GST蛋白的原核表達(dá)及生物信息學(xué)分析

摘要：目的原核表達(dá)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(Glutathione S-Transferase,GST)蛋白,分析其結(jié)構(gòu)與功能特點(diǎn)。方法將EgGST基因亞克隆于PET-28b表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌BL21中,用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷誘導(dǎo)蛋白表達(dá);蛋白經(jīng)Ni柱純化后,用SDS-PAGE及Western-blot進(jìn)行鑒定;并運(yùn)用DNAstar軟件及在線軟件預(yù)測(cè)分析其結(jié)構(gòu)與功能特點(diǎn)。結(jié)果重組EgGST蛋白以可溶性形式在大腸埃希菌中高效表達(dá),其相對(duì)分子質(zhì)量為45 000;該蛋白潛在B細(xì)胞表位區(qū)域?yàn)閍a 26~33,89~97,116~124,147~158,201~215;潛在T細(xì)胞表位區(qū)域?yàn)閍a 12~20,122~120,79~87,61~69,29~37,62~70。結(jié)論成功獲得可溶性重組EgGST蛋白,該蛋白具有一定的免疫原性,具有成為細(xì)粒棘球蚴病疫苗分子潛力。