SNAT2介導蛋氨酸對牛乳腺上皮細胞增殖與自噬的調節作用

摘要：鈉離子依賴性中性氨基酸轉運體2(SNAT2)是一種氨基酸轉運蛋白,可轉運中性氨基酸,廣泛分布于多種細胞中。氨基酸既可作為蛋白質合成的底物,也是調節細胞新陳代謝的關鍵信號分子,但SNAT2是否介導氨基酸調節BMECs增殖和自噬尚未見報道。本研究利用CASY細胞計數和Western blotting技術檢測SNAT2過表達和siRNA干擾后牛乳腺上皮細胞(BMECs)增殖情況以及SNAT2對自噬標志蛋白LC3-Ⅰ/Ⅱ表達量的影響,并利用免疫熒光檢測細胞自噬斑點(LC3-Ⅱ)變化。結果顯示,SNAT2過表達時,p-PI3K、p-mTOR和Cyclin D1表達量增加,反之,p-PI3K、p-mTOR和Cyclin D1表達量下降。SNAT2抑制時,LC3-Ⅱ表達量增加,免疫熒光檢測自噬斑點增多。添加自噬增強劑海藻糖(trehalose,Tre)和蛋氨酸(methionine,Met)后,與單一添加Tre組相比,Met+Tre組p-mTOR表達量增加,LC3-Ⅱ表達量降低,胞漿內綠色自噬斑點減少;添加Tre和Met并抑制SNAT2時,p-mTOR表達量下降,LC3-Ⅱ表達量增多,胞漿內綠色自噬斑點增加。以上結果表明,SNAT2可介導Met通過調控PI3K-mTOR/Cyclin D1信號通路調節BMECs的增殖與自噬。