摘要：針對豬偽狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gE基因保守區(qū)的核苷酸序列設(shè)計1對特異性引物和TaqMan探針,建立并優(yōu)化了一種可快速、定量檢測PRV野毒的TaqMan實時熒光定量PCR方法。應(yīng)用該方法檢測豬常見病毒性病原(豬瘟病毒、豬細(xì)小病毒、豬圓環(huán)病毒2型),PRV gE基因缺失株,以及健康豬的組織,結(jié)果均為陰性,證明該方法特異性良好。該檢測方法能夠檢到的陽性質(zhì)粒模板最低濃度為254 copies/μL,最低病毒濃度為4.22 TCID50/100μL,比常規(guī)PCR敏感性高10倍;重復(fù)性試驗結(jié)果表明該方法重復(fù)性良好;用TaqMan實時熒光定量PCR方法和常規(guī)PCR方法同時檢測37份臨床樣品,其中前者檢出陽性病料22份,陽性檢出率為59.64%,后者檢出陽性病料15份,陽性檢出率為40.54%,2種方法的符合率為81.08%。綜上所述,該方法的建立為PRV的實驗室診斷及流行病學(xué)調(diào)查提供了快速、準(zhǔn)確的檢測手段。