家豬脫髓核細胞基質的制備及其生物相容性評價

摘要：目的:制備家豬脫髓核細胞基質并評價其生物相容性。方法:分離家豬脊柱髓核組織,并逐步經過胰酶、核酶及TritonX-100處理,得到脫髓核細胞基質,DAPI染色觀察脫細胞效果及掃描電鏡觀察脫髓核細胞基質的物理形態特點,將脫髓核細胞基質溶于醋酸,制備成脫細胞基質膜,將大鼠骨髓間充質干細胞接種于基質膜上培養。在第1~5天采用CCK-8檢測骨髓間充質干細胞在脫髓核細胞基質膜上的增殖情況,并計算細胞相對增殖率(RGR)來評價其生物相容性。結果:制備出的家豬脫髓核細胞基質肉眼呈白色糜狀,DAPI染色發現無細胞殘留。掃描電鏡下觀察發現,脫髓核細胞基質由無序排列的膠原纖維組成。通過CCK-8檢測,5d內細胞毒性分級在0級與2級之間。結論:家豬正常髓核組織能夠進行脫細胞處理,且脫細胞后由無序的膠原纖維組成。脫髓核細胞基質具有很好的生物相容性,符合生物工程支架選材標準。