廣西眼鏡蛇毒細胞毒素-2的分離純化及其對大鼠肝星狀細胞HSC-T6的作用

摘要：目的通過層析法從廣西眼鏡蛇毒中分離得到電泳純的細胞毒素-2(CTX-2),探索CTX-2對大鼠肝星狀細胞(HSC-T6)的增殖抑制作用。方法采用DEAE-Sepharose CL-6B陰離子交換層析、Spehadex G-50凝膠層析和Macro-prep High S陽離子交換層析結(jié)合的方法分離眼鏡蛇毒粗毒;經(jīng)SDS-PAGE電泳鑒定蛋白純度;NanoLC-ESI-MS/MS質(zhì)譜方法鑒定其組分并測定分子量;CCK-8法檢測CTX-2對HSC-T6的增殖抑制作用,確定其最小有效濃度。結(jié)果眼鏡蛇毒粗毒經(jīng)分離純化獲得電泳純的CTX-2,其分子量約為9.548 kD;不同濃度CTX-2作用于HSC-T6細胞24 h后,其增殖抑制作用隨濃度增加而增大,呈量效關(guān)系,抑制增殖的最小有效濃度為8 mg/L, IC 50 為11.52 mg/L。結(jié)論廣西眼鏡蛇毒粗毒經(jīng)三步分離法得到電泳純且具有高生物活性的CTX-2;廣西眼鏡蛇毒CTX-2可抑制HSC-T6細胞增殖,抑制作用呈量效關(guān)系。