人Bre1A基因?qū)θ撕戆〩ep-2細胞的生長影響

摘要：為了構(gòu)建攜帶Flag標簽的Bre1A連接酶的真核表達載體,獲得2B-Flag-Bre1A融合表達蛋白,檢測其對腫瘤細胞生長的影響.采用PCR技術從乳腺文庫中擴增出Bre1A基因,并將其正確插入到2B-Flag載體中;將重組質(zhì)粒與空載體分別轉(zhuǎn)染人喉癌細胞系Hep-2后,Western blot檢測表達情況,并進行生長曲線實驗.雙酶切和測序鑒定表明,2B-FlagBre1A真核表達質(zhì)粒構(gòu)建成功;轉(zhuǎn)染Hep-2細胞后成功表達,生長曲線實驗結(jié)果表明,Bre1A抑制喉癌細胞的生長.本論文成功構(gòu)建了攜帶2B-Flag標簽的人Bre1A基因真核表達載體,重組載體能在人喉癌細胞系Hep-2中表達,且能抑制該細胞的生長,本實驗為進一步研究Bre1A在喉癌中的功能奠定了基礎.