Bacillus malacitensis Z-5菌株合成抑菌物質(zhì)培養(yǎng)基優(yōu)化及成分鑒定

摘要：【目的】Bacillus malacitensis Z-5菌株對棉花黃萎病有顯著防治效果,產(chǎn)生抑菌物質(zhì)是其發(fā)揮防治作用的主要因素。本研究旨在優(yōu)化Z-5菌株產(chǎn)生抑菌物質(zhì)的培養(yǎng)基組成,分析抑菌物質(zhì)的成分及其合成相關(guān)基因。【方法】由單因素試驗確定最佳碳源、氮源及無機鹽,利用最速上升法確定碳源、氮源以及無機鹽最優(yōu)含量區(qū)域,根據(jù)Box-Behnken試驗設(shè)計,以發(fā)酵上清液對棉花黃萎病菌大麗輪枝菌(Verticillium dahlia Kleb.)的拮抗活性為指標(biāo),篩選Z-5菌株產(chǎn)生抑菌物質(zhì)的最優(yōu)培養(yǎng)基組成。利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometer,LC-MS)法鑒定抑菌物質(zhì),并對抑菌物質(zhì)合成相關(guān)基因進(jìn)行檢測。【結(jié)果】Z-5菌株產(chǎn)生抑菌物質(zhì)最佳培養(yǎng)基組成為2.68%(質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同)玉米粉、1.45%酵母粉、0.03%K2SO4、0.8%Na2HPO4·12H2O、0.2% NaH2PO4·2H2O(pH 7.2~7.4),抑菌圈直徑為1.34 cm,與預(yù)測值相近,證實該模型可靠有效。抑菌物質(zhì)主要為脂肽抗生素C14表面活性素B,C14~C17伊枯草菌素A,C14、C15、C17伊枯草菌素B等。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測結(jié)果顯示,Z-5菌株基因組含有合成脂肽抗生素的基因srf AB、ituC和ituD?！窘Y(jié)論】本研究優(yōu)化了Z-5菌株產(chǎn)生抑菌物質(zhì)的培養(yǎng)基組成,明確了其抑菌物質(zhì)為脂肽抗生素,為利用該抑菌物質(zhì)進(jìn)行棉花黃萎病菌的防治提供了理論參考和物質(zhì)基礎(chǔ)。