摘要：目的原核表達(dá)制備表位依賴型戊型肝炎診斷抗原，并對(duì)其抗原性及其在急性戊肝診斷的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法以包含密碼子優(yōu)化的GST、HEV優(yōu)勢表位的H15質(zhì)粒為模板，PCR獲取GST-HEV優(yōu)勢表位片段，將其插人表達(dá)質(zhì)粒pET43．1a中，在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)；利用親和層析和陰離子交換層析純化目的蛋白；利用Western Blotting技術(shù)對(duì)目的蛋白抗原性進(jìn)行鑒定；建立HEV-IgM抗體檢測ELISA方法，初步評(píng)價(jià)其對(duì)陰、陽血清樣本的鑒別能力。結(jié)果獲取高度均質(zhì)的表位依賴型急性戊肝診斷抗原；WB實(shí)驗(yàn)表明目的蛋白不但可以被anti-GST單克隆抗體識(shí)別，還可以被戊肝急性期血清相應(yīng)抗體所識(shí)別；分別對(duì)60份戊肝急性期血清、陰性血清進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)其與臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果一致性較高。結(jié)論原核表達(dá)與層析純化可以獲取抗原性優(yōu)異的表位依賴型急性戊肝診斷抗原，偶聯(lián)HRP后可應(yīng)用于HEV-IgM ELISA血清學(xué)檢測。